在法庭的聚光燈尚未亮起之前，在法官的法槌尚未落下之前，一場無聲的較量已在PCR儀的嗡鳴聲中展開。樣本的采集袋貼著防撕標簽，離心機的轉(zhuǎn)子計數(shù)到小數(shù)點后四位，試劑批號與校準日期被逐條錄入LIMS系統(tǒng)——這些看似瑣碎的動作，其實都在為最后那一紙鑒定書筑起“不可推翻”的銅墻鐵壁。當(dāng)遺傳標記的峰圖最終排列成無可爭議的階梯，靜默便擁有了比吶喊更大的力量。

一、核心技術(shù)原理

現(xiàn)代親子鑒定主要依賴DNA分型技術(shù)，核心在于分析個體間特定的遺傳標記（STR位點）的匹配程度。

人類遺傳基礎(chǔ)：除同卵**外，每個人的DNA序列都具有唯一性。子女的DNA一半來自生父，一半來自生母。

STR位點：即短串聯(lián)重復(fù)序列，是DNA上特定位置的重復(fù)堿基序列（如“AGAT”重復(fù)多次）。不同個體在同一STR位點上的重復(fù)次數(shù)通常不同。

分型檢測：通過聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）技術(shù)，大量擴增樣本DNA中的特定STR位點片段，然后利用毛細管電泳等技術(shù)精確測定每個STR位點的片段長度（即重復(fù)次數(shù)），從而得到個體的DNA遺傳圖譜。

親緣關(guān)系判定：將被測孩子（C）的DNA圖譜與假定父親（AF）和/或假定母親（AM）的圖譜進行比對。在每個檢測的STR位點上，孩子的一個等位基因必須來自生父，一個來自生母。通過統(tǒng)計學(xué)方法計算親權(quán)指數(shù)（PI）和累積親權(quán)指數(shù)（CPI），最終得出親權(quán)概率（RCP），通常要求RCP≥99、99%才能支持存在親子關(guān)系。

二、標準化技術(shù)操作流程

（一）樣本采集

1、人員準備：

核實身份信息（司法鑒定需查驗原件），簽署知情同意書（司法鑒定需捺指印）。采樣人員須佩戴手套，必要時佩戴口罩及帽子。

2、樣本采集規(guī)范：

口腔拭子（首選方法）：

被檢者清水漱口后，以無菌棉簽在口腔內(nèi)側(cè)往返刮擦20-30次，同法采集另一側(cè)樣本。將棉簽自然晾干后置于紙質(zhì)信封，標注相關(guān)信息。

靜脈血（司法鑒定常規(guī)）：

由醫(yī)護人員采集2-5ml EDTA抗凝血，輕柔混勻后冷藏保存。

血痕樣本：

使用采血針刺破指尖，取3-5滴血液滴于采血卡上，自然晾干后封裝保存。

特殊樣本：

毛發(fā)需包含完整毛囊5-8根；煙頭、口香糖等特殊樣本需提前與鑒定機構(gòu)確認要求。

3、樣本封裝要求：

采用獨立包裝，清晰標注編號、姓名等信息。司法鑒定樣本須現(xiàn)場封存并由當(dāng)事人及采樣人員簽字確認。

（二）樣本保存與運輸

口腔拭子/血痕卡：常溫避光保存，建議7日內(nèi)送達實驗室。靜脈血需2-8℃冷藏保存，24-48小時內(nèi)送檢。特殊樣本按機構(gòu)具體要求進行保存和運輸。

（三）實驗室檢測

1、樣本接收登記：核對送檢信息，發(fā)現(xiàn)異常及時聯(lián)系委托方。

2、DNA提?。翰捎昧呀庖合毎尫臘NA。

3、DNA質(zhì)量檢測：測定濃度及純度指標。

4、PCR擴增：針對STR位點進行特異性擴增。

5、STR分型分析：通過毛細管電泳技術(shù)檢測DNA片段。

6、質(zhì)量控制：設(shè)置質(zhì)控對照，嚴格執(zhí)行分區(qū)操作規(guī)范。

（四）數(shù)據(jù)分析與親權(quán)關(guān)系計算

1、數(shù)據(jù)審核：技術(shù)員與審核員共同核查基因圖譜質(zhì)量和分型準確性。

2、三聯(lián)體分析：

通過比對孩子的STR位點，在排除母親基因貢獻后確定生父基因來源。若假定父親(AF)未檢測到必需等位基因，則判定為"排除"。PI值按X/Y公式計算，其中X代表AF提供生父基因的概率，Y代表隨機人群提供該基因的概率。

3、二聯(lián)體分析：

直接判斷孩子等位基因是否來自AF。計算PI值時需考慮基因可能源自母親的情況。

4、CPI計算：將各STR位點PI值相乘得出CPI值，當(dāng)CPI≥10000（對應(yīng)RCP≥99.99%）時支持親子關(guān)系認定。

5、RCP計算：RCP=CPI/(CPI+1)×100%，表示親子關(guān)系的統(tǒng)計學(xué)概率。

6、判定標準：

支持親子關(guān)系：所有檢測位點符合遺傳規(guī)律且CPI≥10000

排除親子關(guān)系：3個及以上位點不符合遺傳規(guī)律

無法結(jié)論：特殊情況需補充檢測

（五）報告出具

1、報告內(nèi)容：

包含機構(gòu)資質(zhì)、委托方信息、被鑒定人資料、鑒定方法、試劑盒參數(shù)、分型結(jié)果、分析結(jié)論、鑒定意見、人員簽名及機構(gòu)蓋章等內(nèi)容。

2、報告簽發(fā)：由授權(quán)簽字人審核簽發(fā)。

三、注意事項

1、資質(zhì)要求：司法鑒定需選擇具有法醫(yī)物證鑒定資質(zhì)的正規(guī)機構(gòu)。

2、樣本要求：確保樣本真實可靠，司法鑒定須現(xiàn)場采樣。

3、質(zhì)量控制：嚴格防控污染風(fēng)險，確保樣本質(zhì)量達標。

4、特殊情況：

基因突變可能導(dǎo)致個別位點異常

近親關(guān)系可能干擾結(jié)果判斷

STR技術(shù)無法鑒別同卵**

5、報告解讀：

CPI/RCP為概率性結(jié)論

建議咨詢專業(yè)機構(gòu)解讀結(jié)果

親子鑒定是嚴謹?shù)目茖W(xué)檢測過程，需選擇正規(guī)機構(gòu)確保結(jié)果準確可靠。