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民鑒基因親子鑒定 / 鑒定科普

特別提示:接受試管嬰兒技術(shù)的夫婦必須是合法夫妻,且僅限于治療因特定不孕不育問題而無法通過其他方式懷孕的夫婦。

親子鑒定溶血樣本電泳圖譜干擾的消除方法

2025-07-17 鑒定科普 9

在法庭的聚光燈尚未亮起之前,在法官的法槌尚未落下之前,一場無聲的較量已在PCR儀的嗡鳴聲中展開。樣本的采集袋貼著防撕標(biāo)簽,離心機的轉(zhuǎn)子計數(shù)到小數(shù)點后四位,試劑批號與校準(zhǔn)日期被逐條錄入LIMS系統(tǒng)——這些看似瑣碎的動作,其實都在為最后那一紙鑒定書筑起“不可推翻”的銅墻鐵壁。當(dāng)遺傳標(biāo)記的峰圖最終排列成無可爭議的階梯,靜默便擁有了比吶喊更大的力量。

一、親子鑒定核心技術(shù)原理

現(xiàn)代親子鑒定主要基于DNA分型技術(shù),其核心在于比對分析個體間特定遺傳標(biāo)記(STR位點)的匹配程度。

人類遺傳基礎(chǔ):

除同卵**外,每個人的DNA序列都具有獨特性。子女的遺傳物質(zhì)一半源自生物學(xué)父親,一半來自生物學(xué)母親。

STR位點解析:

即短串聯(lián)重復(fù)序列,指DNA上特定區(qū)域存在的重復(fù)堿基序列(如"AGAT"重復(fù)多次)。不同個體在同一STR位點上的重復(fù)次數(shù)往往存在差異。

分型檢測技術(shù):

通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對樣本DNA中的特定STR位點片段進(jìn)行擴增,再運用毛細(xì)管電泳等技術(shù)精確測定各STR位點的片段長度(即重復(fù)次數(shù)),從而構(gòu)建個體的DNA遺傳圖譜。

親緣關(guān)系判定標(biāo)準(zhǔn):

將被檢測兒童(C)的DNA圖譜與假定父親(AF)和/或假定母親(AM)的圖譜進(jìn)行比對分析。在每個檢測的STR位點上,孩子必須繼承一個來自生父的等位基因和一個來自生母的等位基因。通過統(tǒng)計學(xué)方法計算親權(quán)指數(shù)(PI)和累積親權(quán)指數(shù)(CPI),最終得出親權(quán)概率(RCP)。通常要求RCP≥99.99%才能確認(rèn)親子關(guān)系。

二、標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)操作流程

(一)樣本采集

1、人員準(zhǔn)備:

核實身份信息(司法鑒定需查驗原件),簽署知情同意書(司法鑒定需捺指?。2蓸尤藛T須佩戴手套,必要時佩戴口罩及帽子。

2、樣本采集規(guī)范:

口腔拭子(首選方法):

被檢者清水漱口后,以無菌棉簽在口腔內(nèi)側(cè)往返刮擦20-30次,同法采集另一側(cè)樣本。將棉簽自然晾干后置于紙質(zhì)信封,標(biāo)注相關(guān)信息。

靜脈血(司法鑒定常規(guī)):

由醫(yī)護人員采集2-5ml EDTA抗凝血,輕柔混勻后冷藏保存。

血痕樣本:

使用采血針刺破指尖,取3-5滴血液滴于采血卡上,自然晾干后封裝保存。

特殊樣本:

毛發(fā)需包含完整毛囊5-8根;煙頭、口香糖等特殊樣本需提前與鑒定機構(gòu)確認(rèn)要求。

3、樣本封裝要求:

采用獨立包裝,清晰標(biāo)注編號、姓名等信息。司法鑒定樣本須現(xiàn)場封存并由當(dāng)事人及采樣人員簽字確認(rèn)。

(二)樣本保存與運輸

口腔拭子/血痕卡:常溫避光保存,建議7日內(nèi)送達(dá)實驗室。靜脈血需2-8℃冷藏保存,24-48小時內(nèi)送檢。特殊樣本按機構(gòu)具體要求進(jìn)行保存和運輸。

(三)實驗室檢測

1、樣本接收登記:核對送檢信息,發(fā)現(xiàn)異常及時聯(lián)系委托方。

2、DNA提取:采用裂解液消化細(xì)胞釋放DNA。

3、DNA質(zhì)量檢測:測定濃度及純度指標(biāo)。

4、PCR擴增:針對STR位點進(jìn)行特異性擴增。

5、STR分型分析:通過毛細(xì)管電泳技術(shù)檢測DNA片段。

6、質(zhì)量控制:設(shè)置質(zhì)控對照,嚴(yán)格執(zhí)行分區(qū)操作規(guī)范。

(四)數(shù)據(jù)分析與親權(quán)關(guān)系計算

1、數(shù)據(jù)審核:技術(shù)員與審核員共同核查基因圖譜質(zhì)量和分型準(zhǔn)確性。

2、三聯(lián)體分析:

通過比對孩子的STR位點,在排除母親基因貢獻(xiàn)后確定生父基因來源。若假定父親(AF)未檢測到必需等位基因,則判定為"排除"。PI值按X/Y公式計算,其中X代表AF提供生父基因的概率,Y代表隨機人群提供該基因的概率。

3、二聯(lián)體分析:

直接判斷孩子等位基因是否來自AF。計算PI值時需考慮基因可能源自母親的情況。

4、CPI計算:將各STR位點PI值相乘得出CPI值,當(dāng)CPI≥10000(對應(yīng)RCP≥99.99%)時支持親子關(guān)系認(rèn)定。

5、RCP計算:RCP=CPI/(CPI+1)×100%,表示親子關(guān)系的統(tǒng)計學(xué)概率。

6、判定標(biāo)準(zhǔn):

支持親子關(guān)系:所有檢測位點符合遺傳規(guī)律且CPI≥10000

排除親子關(guān)系:3個及以上位點不符合遺傳規(guī)律

無法結(jié)論:特殊情況需補充檢測

(五)報告出具

1、報告內(nèi)容:

包含機構(gòu)資質(zhì)、委托方信息、被鑒定人資料、鑒定方法、試劑盒參數(shù)、分型結(jié)果、分析結(jié)論、鑒定意見、人員簽名及機構(gòu)蓋章等內(nèi)容。

2、報告簽發(fā):由授權(quán)簽字人審核簽發(fā)。

三、注意事項

1、資質(zhì)要求:司法鑒定需選擇具備法醫(yī)物證鑒定資質(zhì)的專業(yè)機構(gòu)。

2、樣本要求:確保樣本真實有效,司法鑒定必須現(xiàn)場采樣。

3、質(zhì)量控制:嚴(yán)格防范污染風(fēng)險,保障樣本質(zhì)量。

4、特殊情況:

基因突變可能導(dǎo)致個別位點異常

近親關(guān)系可能影響結(jié)果判斷

STR技術(shù)無法區(qū)分同卵**

5、報告解讀:

CPI/RCP為概率性結(jié)論

建議咨詢專業(yè)機構(gòu)解讀結(jié)果

親子鑒定是嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)檢測過程,需選擇正規(guī)機構(gòu)確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

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