從部落的圖騰到宗族的譜牒，人類始終在尋找“我是誰、來自誰”的答案。當現(xiàn)代科技把鏡頭拉近到細胞核深處，那條靜默的雙螺旋便成為最具說服力的“族譜”。親子鑒定，早已超越“像與不像”的肉眼觀察，而成為一次在分子層面上的身份公證：從一根毛囊到一滴血跡，樣本的每一次轉移、每一次擴增、每一次比對，都被寫進了可追溯、可復核、可問責的法定程序。它既是一場微觀世界的探險，也是一次宏觀倫理的裁判。

一、核心技術原理

現(xiàn)代親子鑒定主要依賴DNA分型技術，核心在于分析個體間特定的遺傳標記（STR位點）的匹配程度。

人類遺傳基礎：除同卵**外，每個人的DNA序列都具有唯一性。子女的DNA一半來自生父，一半來自生母。

STR位點：即短串聯(lián)重復序列，是DNA上特定位置的重復堿基序列（如“AGAT”重復多次）。不同個體在同一STR位點上的重復次數(shù)通常不同。

分型檢測：通過聚合酶鏈式反應（PCR）技術，大量擴增樣本DNA中的特定STR位點片段，然后利用毛細管電泳等技術精確測定每個STR位點的片段長度（即重復次數(shù)），從而得到個體的DNA遺傳圖譜。

親緣關系判定：將被測孩子（C）的DNA圖譜與假定父親（AF）和/或假定母親（AM）的圖譜進行比對。在每個檢測的STR位點上，孩子的一個等位基因必須來自生父，一個來自生母。通過統(tǒng)計學方法計算親權指數(shù)（PI）和累積親權指數(shù)（CPI），最終得出親權概率（RCP），通常要求RCP≥99、99%才能支持存在親子關系。

二、標準化技術操作流程

（一）樣本采集（關鍵第一步）

1、人員準備：

確認所有參與者的身份（司法鑒定需核對證件原件）。

簽署知情同意書（司法鑒定需按手印）。

采集人員需佩戴干凈手套，必要時佩戴口罩、帽子。

2、常用樣本類型與采集方法：

口腔拭子（最常用、無創(chuàng)、推薦首選）：

請被采樣人清水漱口（半小時內勿進食飲水）。

取出無菌醫(yī)用棉簽，緊握棉簽桿，將棉簽頭在口腔內壁（臉頰內側）用力旋轉刮擦至少20-30次，確保充分接觸粘膜細胞。同法采集另一側。

將棉簽垂直放置在清潔的采樣卡或干凈白紙上，自然晾干（避免陽光直射、熱源烘烤，切勿用嘴吹）。

完全干燥后（通常需30-60分鐘），放入干凈的紙質信封袋，標記清晰信息（姓名、采樣日期、關系如“子”、“父”等）。切勿使用塑料袋密封，以防霉變。

關鍵點：避免棉簽接觸其他物品；確保充分刮擦獲得足夠細胞；徹底干燥是防止霉變降解的關鍵。

靜脈血（司法鑒定常用）：

由專業(yè)醫(yī)護人員操作。

常規(guī)消毒穿刺部位，抽取適量靜脈血（通常2-5mlEDTA抗凝血）。

輕輕顛倒混勻抗凝管數(shù)次。

標記清楚，按機構要求保存（通常4℃冷藏）和運輸。

血痕樣本：

消毒指尖（或耳垂），用一次性采血針輕刺。

取3-5滴血液（每滴約黃豆大小）滴在專用采血卡（如FTA卡）或干凈濾紙上。

自然晾干（避免重疊、污染、暴曬、烘烤）。

完全干燥后放入紙質信封袋，標記清楚。

特殊樣本（如毛發(fā)、煙頭、口香糖、精斑等）：

此類樣本DNA含量少或易降解，需特殊處理，務必提前咨詢鑒定機構確認是否可檢及具體要求。

例如毛發(fā)：需帶有肉眼可見的毛囊（根部白色小囊），至少5-8根。手捏毛干部分取下，勿觸碰毛囊。晾干后放入紙袋。

3、樣本標記與封裝：

每個樣本獨立包裝，在包裝袋外清晰、牢固地標記唯一編號、姓名（或代號）、樣本類型、采樣日期、關系。

所有樣本連同填寫完整的委托書、身份證明復印件（司法鑒定需要）等一同放入大信封或樣本盒。司法鑒定樣本需當場封存，當事人及采樣人簽字/按手印確認。

生物安全：所有樣本均視為潛在生物危害物，封裝需防泄漏，運輸需符合相關生物安全規(guī)定。

（二）樣本保存與運輸

口腔拭子/血痕卡：常溫、干燥、避光保存。盡快送檢（通常建議采樣后一周內送達實驗室）。避免高溫、高濕、化學污染。

靜脈血：需冷藏（2-8℃）保存和運輸（冰袋或冷鏈）。嚴禁冷凍，否則會溶血破壞細胞。盡快送檢（通常建議24-48小時內）。

特殊樣本：按機構具體要求保存（如冷凍、干燥等），盡快送檢。

運輸：選擇可靠的快遞公司，確保包裝牢固、防壓、防漏、符合生物安全要求。告知快遞內含生物樣本。

（三）實驗室檢測

樣本抵達具備資質的實驗室后，將經(jīng)歷嚴格流程：

1、樣本接收與登記：核對樣本信息、數(shù)量、狀態(tài)（是否污染、霉變、滲漏等），登記入庫，分配唯一實驗編號。狀態(tài)異常會聯(lián)系委托方。

2、DNA提?。?/strong>在專門的樣本制備區(qū)進行。

口腔拭子/血痕卡：剪下含樣本部分，使用裂解液（含蛋白酶K）消化細胞膜、核膜，釋放DNA。

靜脈血：離心分離白細胞，裂解釋放DNA。

特殊樣本：采用針對性方法（如毛囊刮取、精斑浸泡等）提取。

通過離心柱吸附法或磁珠法等純化DNA，去除雜質（蛋白質、色素、抑制劑等）。

3、DNA定量與質檢：使用紫外分光光度計或熒光定量儀測量DNA濃度和純度（如A260/A280比值），確保提取的DNA質量和數(shù)量滿足后續(xù)PCR擴增要求。

4、PCR擴增：在PCR準備區(qū)配置反應體系。

將提取的DNA、引物（特異性識別STR位點兩端）、TaqDNA聚合酶、dNTPs（合成原料）、緩沖液等混合。

在PCR儀中進行熱循環(huán)：變性（高溫解鏈DNA）→退火（引物結合到模板）→延伸（合成新鏈）。經(jīng)過約30個循環(huán)，目標STR片段被指數(shù)級擴增。

5、STR分型檢測：在擴增產(chǎn)物分析區(qū)進行。

毛細管電泳（主流方法）：將PCR產(chǎn)物與內標（SizeStandard）和去離子甲酰胺混合，上樣到毛細管電泳儀。在高電壓下，不同長度的DNA片段在毛細管內的聚合物中遷移速度不同。通過激光激發(fā)熒光標記（引物上帶有不同顏色的熒光染料），檢測器記錄每個片段的出峰時間和熒光顏色。

數(shù)據(jù)采集與分析：專業(yè)軟件將電泳信號轉換為數(shù)字化的基因圖譜，精確讀出每個STR位點的等位基因大小（重復次數(shù)）。生成包含所有檢測位點分型結果的表格。

6、質量控制（貫穿全程）：

陰性對照：不含DNA模板的PCR反應，監(jiān)測試劑污染。

陽性對照：已知分型的標準品，監(jiān)測試劑和儀器性能。

內標：確保片段大小判讀準確。

實驗分區(qū)：嚴格物理隔離（樣本制備區(qū)、PCR前區(qū)、PCR后區(qū)、檢測區(qū)），單向氣流，防止擴增產(chǎn)物污染。

人員資質與操作規(guī)范：實驗人員需經(jīng)專業(yè)培訓，嚴格遵循SOP操作。

（四）數(shù)據(jù)分析與親權關系計算

1、數(shù)據(jù)審核：由技術員和審核員共同復核基因圖譜質量及分型結果準確性。

2、三聯(lián)體分析：

通過比對孩子的STR位點，在排除母親基因貢獻后確定生父基因來源。若假定父親(AF)未檢出必需等位基因，則判定為"排除"。PI值按X/Y公式計算，其中X表示AF提供生父基因的概率，Y表示隨機人群攜帶該基因的概率。

3、二聯(lián)體分析：

直接分析孩子等位基因是否源自AF。計算PI值時需考慮基因可能來自母親的情況。

4、CPI計算：將各STR位點的PI值相乘得到CPI值，當CPI≥10000（相當于RCP≥99.99%）時支持親子關系認定。

5、RCP計算：RCP=CPI/(CPI+1)×100%，反映親子關系的統(tǒng)計學概率。

6、判定標準：

支持親子關系：所有檢測位點符合遺傳規(guī)律且CPI≥10000

排除親子關系：3個或以上位點不符合遺傳規(guī)律

無法結論：特殊情況需補充檢測

（五）報告出具

1、報告內容：

包含機構信息、委托方資料、被鑒定人信息、鑒定方法、試劑盒信息、分型結果、分析說明、鑒定意見、人員簽名及機構蓋章等內容。

2、報告簽發(fā)：由授權簽字人審核后簽發(fā)。

三、注意事項

1、資質要求：司法鑒定需選擇具備法醫(yī)物證鑒定資質的專業(yè)機構。

2、樣本要求：確保樣本真實有效，司法鑒定必須現(xiàn)場采樣。

3、質量控制：嚴格防范污染風險，保障樣本質量。

4、特殊情況：

基因突變可能導致個別位點異常

近親關系可能影響結果判斷

STR技術無法區(qū)分同卵**

5、報告解讀：

CPI/RCP為概率性結論

建議咨詢專業(yè)機構解讀結果

親子鑒定是嚴謹?shù)目茖W檢測過程，需選擇正規(guī)機構確保結果準確可靠。