血脈親緣的認定，自古便是族群存續(xù)的關鍵議題。進入科學紀元后，親子鑒識已由往昔的道德推演，進化為一套精確、規(guī)范且具極強法證效力的技術體系。其根本，在于對生物最本源的遺傳指令——DNA——實施嚴謹?shù)钠谱g與核對。這并非單純的實驗臺操作，而是一連串層層銜接、標準嚴苛的程序，從樣本初始取樣直至最終文書的權威簽章，每一步均牽動結論的精準與裁斷的公允。

一、親子鑒定核心技術原理
現(xiàn)代親子鑒定主要基于DNA分型技術，其核心在于比對分析個體間特定遺傳標記（STR位點）的匹配程度。
人類遺傳基礎：
除同卵**外，每個人的DNA序列都具有獨特性。子女的遺傳物質一半源自生物學父親，一半來自生物學母親。
STR位點解析：
即短串聯(lián)重復序列，指DNA上特定區(qū)域存在的重復堿基序列（如"AGAT"重復多次）。不同個體在同一STR位點上的重復次數(shù)往往存在差異。
分型檢測技術：
通過聚合酶鏈式反應（PCR）對樣本DNA中的特定STR位點片段進行擴增，再運用毛細管電泳等技術精確測定各STR位點的片段長度（即重復次數(shù)），從而構建個體的DNA遺傳圖譜。
親緣關系判定標準：
將被檢測兒童（C）的DNA圖譜與假定父親（AF）和/或假定母親（AM）的圖譜進行比對分析。在每個檢測的STR位點上，孩子必須繼承一個來自生父的等位基因和一個來自生母的等位基因。通過統(tǒng)計學方法計算親權指數(shù)（PI）和累積親權指數(shù)（CPI），最終得出親權概率（RCP）。通常要求RCP≥99.99%才能確認親子關系。

二、標準化技術操作流程
（一）樣本采集（關鍵第一步）
1、人員準備：
確認所有參與者的身份（司法鑒定需核對證件原件）。
簽署知情同意書（司法鑒定需按手印）。
采集人員需佩戴干凈手套，必要時佩戴口罩、帽子。
2、常用樣本類型與采集方法：
口腔拭子（最常用、無創(chuàng)、推薦首選）：
請被采樣人清水漱口（半小時內勿進食飲水）。
取出無菌醫(yī)用棉簽，緊握棉簽桿，將棉簽頭在口腔內壁（臉頰內側）用力旋轉刮擦至少20-30次，確保充分接觸粘膜細胞。同法采集另一側。
將棉簽垂直放置在清潔的采樣卡或干凈白紙上，自然晾干（避免陽光直射、熱源烘烤，切勿用嘴吹）。
完全干燥后（通常需30-60分鐘），放入干凈的紙質信封袋，標記清晰信息（姓名、采樣日期、關系如“子”、“父”等）。切勿使用塑料袋密封，以防霉變。
關鍵點：避免棉簽接觸其他物品；確保充分刮擦獲得足夠細胞；徹底干燥是防止霉變降解的關鍵。
靜脈血（司法鑒定常用）：
由專業(yè)醫(yī)護人員操作。
常規(guī)消毒穿刺部位，抽取適量靜脈血（通常2-5mlEDTA抗凝血）。
輕輕顛倒混勻抗凝管數(shù)次。
標記清楚，按機構要求保存（通常4℃冷藏）和運輸。
血痕樣本：
消毒指尖（或耳垂），用一次性采血針輕刺。
取3-5滴血液（每滴約黃豆大小）滴在專用采血卡（如FTA卡）或干凈濾紙上。
自然晾干（避免重疊、污染、暴曬、烘烤）。
完全干燥后放入紙質信封袋，標記清楚。
特殊樣本（如毛發(fā)、煙頭、口香糖、精斑等）：
此類樣本DNA含量少或易降解，需特殊處理，務必提前咨詢鑒定機構確認是否可檢及具體要求。
例如毛發(fā)：需帶有肉眼可見的毛囊（根部白色小囊），至少5-8根。手捏毛干部分取下，勿觸碰毛囊。晾干后放入紙袋。
3、樣本標記與封裝：
每個樣本獨立包裝，在包裝袋外清晰、牢固地標記唯一編號、姓名（或代號）、樣本類型、采樣日期、關系。
所有樣本連同填寫完整的委托書、身份證明復印件（司法鑒定需要）等一同放入大信封或樣本盒。司法鑒定樣本需當場封存，當事人及采樣人簽字/按手印確認。
生物安全：所有樣本均視為潛在生物危害物，封裝需防泄漏，運輸需符合相關生物安全規(guī)定。
（二）樣本保存與運輸
口腔拭子/血痕卡：常溫、干燥、避光保存。盡快送檢（通常建議采樣后一周內送達實驗室）。避免高溫、高濕、化學污染。
靜脈血：需冷藏（2-8℃）保存和運輸（冰袋或冷鏈）。嚴禁冷凍，否則會溶血破壞細胞。盡快送檢（通常建議24-48小時內）。
特殊樣本：按機構具體要求保存（如冷凍、干燥等），盡快送檢。
運輸：選擇可靠的快遞公司，確保包裝牢固、防壓、防漏、符合生物安全要求。告知快遞內含生物樣本。
（三）實驗室檢測
樣本抵達具備資質的實驗室后，將經(jīng)歷嚴格流程：
1、樣本接收與登記：核對樣本信息、數(shù)量、狀態(tài)（是否污染、霉變、滲漏等），登記入庫，分配唯一實驗編號。狀態(tài)異常會聯(lián)系委托方。
2、DNA提取：在專門的樣本制備區(qū)進行。
口腔拭子/血痕卡：剪下含樣本部分，使用裂解液（含蛋白酶K）消化細胞膜、核膜，釋放DNA。
靜脈血：離心分離白細胞，裂解釋放DNA。
特殊樣本：采用針對性方法（如毛囊刮取、精斑浸泡等）提取。
通過離心柱吸附法或磁珠法等純化DNA，去除雜質（蛋白質、色素、抑制劑等）。
3、DNA定量與質檢：使用紫外分光光度計或熒光定量儀測量DNA濃度和純度（如A260/A280比值），確保提取的DNA質量和數(shù)量滿足后續(xù)PCR擴增要求。
4、PCR擴增：在PCR準備區(qū)配置反應體系。
將提取的DNA、引物（特異性識別STR位點兩端）、TaqDNA聚合酶、dNTPs（合成原料）、緩沖液等混合。
在PCR儀中進行熱循環(huán)：變性（高溫解鏈DNA）→退火（引物結合到模板）→延伸（合成新鏈）。經(jīng)過約30個循環(huán)，目標STR片段被指數(shù)級擴增。
5、STR分型檢測：在擴增產物分析區(qū)進行。
毛細管電泳（主流方法）：將PCR產物與內標（SizeStandard）和去離子甲酰胺混合，上樣到毛細管電泳儀。在高電壓下，不同長度的DNA片段在毛細管內的聚合物中遷移速度不同。通過激光激發(fā)熒光標記（引物上帶有不同顏色的熒光染料），檢測器記錄每個片段的出峰時間和熒光顏色。
數(shù)據(jù)采集與分析：專業(yè)軟件將電泳信號轉換為數(shù)字化的基因圖譜，精確讀出每個STR位點的等位基因大?。ㄖ貜痛螖?shù)）。生成包含所有檢測位點分型結果的表格。
6、質量控制（貫穿全程）：
陰性對照：不含DNA模板的PCR反應，監(jiān)測試劑污染。
陽性對照：已知分型的標準品，監(jiān)測試劑和儀器性能。
內標：確保片段大小判讀準確。
實驗分區(qū)：嚴格物理隔離（樣本制備區(qū)、PCR前區(qū)、PCR后區(qū)、檢測區(qū)），單向氣流，防止擴增產物污染。
人員資質與操作規(guī)范：實驗人員需經(jīng)專業(yè)培訓，嚴格遵循SOP操作。
（四）數(shù)據(jù)分析與親權關系計算
1、數(shù)據(jù)審核：由技術員和審核員共同復核基因圖譜質量及分型結果準確性。
2、三聯(lián)體分析：
通過比對孩子的STR位點，在排除母親基因貢獻后確定生父基因來源。若假定父親(AF)未檢出必需等位基因，則判定為"排除"。PI值按X/Y公式計算，其中X表示AF提供生父基因的概率，Y表示隨機人群攜帶該基因的概率。
3、二聯(lián)體分析：
直接分析孩子等位基因是否源自AF。計算PI值時需考慮基因可能來自母親的情況。
4、CPI計算：將各STR位點的PI值相乘得到CPI值，當CPI≥10000（相當于RCP≥99.99%）時支持親子關系認定。
5、RCP計算：RCP=CPI/(CPI+1)×100%，反映親子關系的統(tǒng)計學概率。
6、判定標準：
支持親子關系：所有檢測位點符合遺傳規(guī)律且CPI≥10000
排除親子關系：3個或以上位點不符合遺傳規(guī)律
無法結論：特殊情況需補充檢測
（五）報告出具
1、報告內容：
包含機構信息、委托方資料、被鑒定人信息、鑒定方法、試劑盒信息、分型結果、分析說明、鑒定意見、人員簽名及機構蓋章等內容。
2、報告簽發(fā)：由授權簽字人審核后簽發(fā)。

三、注意事項
1、資質要求：司法鑒定需選擇具備法醫(yī)物證鑒定資質的專業(yè)機構。
2、樣本要求：確保樣本真實有效，司法鑒定必須現(xiàn)場采樣。
3、質量控制：嚴格防范污染風險，保障樣本質量。
4、特殊情況：
基因突變可能導致個別位點異常
近親關系可能影響結果判斷
STR技術無法區(qū)分同卵**
5、報告解讀：
CPI/RCP為概率性結論
建議咨詢專業(yè)機構解讀結果
親子鑒定是嚴謹?shù)目茖W檢測過程，需選擇正規(guī)機構確保結果準確可靠。