試管嬰兒技術(shù)，作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分，自20世紀(jì)末以來在全球范圍內(nèi)得到廣泛應(yīng)用。在國內(nèi)，隨著生殖醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，試管嬰兒技術(shù)也經(jīng)歷了從一代到三代的演變。對于許多不孕不育家庭來說，理解這些技術(shù)的不同之處及其對多胎妊娠的可能性有著重要的意義。

試管保存細(xì)胞的方法

一般來說，細(xì)胞保存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用保存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。既可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，又起到了細(xì)胞保種的作用。而保存細(xì)胞有以下兩種方法：　

1、傳統(tǒng)方法：

放好胚胎的保存管置于4℃10分鐘、-20 ℃30分鐘、-80 ℃ 16～18小時(或隔夜)、液氮槽vaporphase長期儲存。-20 ℃不可超過1小時，以防止胞內(nèi)冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

2、程序降溫：

利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1～-3 ℃/分鐘之速度由室溫降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase長期儲存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。

細(xì)胞保存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)，添加保存保護(hù)劑可以很好的改善細(xì)胞的破壞與死亡情況。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下保存，細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成水晶從而引發(fā)一系列的不良反應(yīng)：首先，部分蛋白質(zhì)因局部電解質(zhì)濃度增高和pH值改變而變性，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。其次，細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成和細(xì)胞膜系統(tǒng)上蛋白質(zhì)，酶的變性等會限礙細(xì)胞的能量代謝。再次，胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體在保存中易發(fā)生破壞引起胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物喪失。最后，隨著保存溫度的降低，冰晶體積膨脹造成DNA的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生損傷從而引起細(xì)胞死亡。

試管嬰兒降調(diào)成功的標(biāo)準(zhǔn)

降調(diào)成功的標(biāo)準(zhǔn)有卵泡、子宮內(nèi)膜標(biāo)準(zhǔn)和體內(nèi)激素水平的指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)，彩超監(jiān)測卵泡如果發(fā)現(xiàn)體內(nèi)有多個直徑小于5毫米的卵泡且大小接近相等。子宮內(nèi)膜的厚度在5毫米以下，抽血監(jiān)測體內(nèi)激素水平，促黃體激素在10mIU/ml以下、促卵泡激素小于10mIU/ml，符合以上標(biāo)準(zhǔn)時說明降調(diào)成功，降調(diào)成功是試管嬰兒非常關(guān)鍵的一項(xiàng)，使用的藥物是促性腺激素釋放激素類似物。目的就是在一個月經(jīng)周期促進(jìn)多個卵泡發(fā)育成熟，可以一次取多個卵泡，可以在體外培育多個胚胎，從而在多個胚胎中選擇質(zhì)量好的胚胎進(jìn)行試管移植，可以有效的提高試管嬰兒移植成功率。

總之，試管降調(diào)不成功，并不代表試管一定會失敗。當(dāng)然，試管降調(diào)不成功，有可能是由于放置胚胎或著女性身體原因。