ROS1屬于酪氨酸激酶胰島素受體的家族成員之一，在多種腫瘤細(xì)胞系中高表達(dá)，最初1987年在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤中被發(fā)現(xiàn)。2007年Rikova等利用磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)證實(shí)ROS1重排是非小細(xì)胞肺癌發(fā)生、發(fā)展中的驅(qū)動(dòng)基因。隨后證實(shí)克唑替尼和恩曲替尼對(duì)ROS1重排有效，并被批準(zhǔn)用于臨床治療。日前，《自然評(píng)論臨床腫瘤學(xué)》（NatureReviewsClinicalOncology）發(fā)表一篇對(duì)于腫瘤ROS1的綜述文章，系統(tǒng)闡述了ROS1生物學(xué)功能、診斷方法、臨床治療策略及耐藥機(jī)制1。

一ROS1生物學(xué)功能

ROS1基因位于第6號(hào)染色體q21區(qū)，全長(zhǎng)cDNA包含44個(gè)外顯子，編碼2347個(gè)氨基酸，胰島素受體的成員RTKs家族ROIS1與ALK，77%的的酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域之間存在同源性，因此ALK小分子抑止劑克唑替尼在治療ROS1發(fā)生融合變異的NSCLC中具有明顯療效。

在致病機(jī)理方面，盡管缺乏ROS1激活的合適配體或小分子激活劑，先前應(yīng)用點(diǎn)突變和EGFR胞外受體部分構(gòu)建的EGFR-ROS1嵌合蛋白表達(dá)技術(shù)業(yè)已證明，ROS1受體酪氨酸激酶參與激活多條下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，包括RAS-RAF-MEK-ERK,PI3K-AKT-mTOR和JAK-STAT3等通路，與腫瘤細(xì)胞增殖、存活和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

圖1.ROS1基因結(jié)構(gòu)和信號(hào)通路

二ROS1基因變異類型及分子診斷

ROS1基因變異包括融合、突變和擴(kuò)增，融合是ROS1主要變異類型，目前至少發(fā)現(xiàn)55種伴侶基因。不同腫瘤，伴侶基因存在差異，NSCLC和神經(jīng)膠質(zhì)瘤主要伴侶基因分別為CD74和GOPC。已在22種腫瘤中檢測(cè)到ROS1融合基因，不同腫瘤中ROS1融合基因發(fā)生率不同，NSCLC為1-2%，胃腸道腫瘤為1-9%，神經(jīng)膠質(zhì)瘤為0.5-1%。

目前檢測(cè)ROS1融合基因的方法，包括傳統(tǒng)的FISH、IHC、RT-PCR，但是這些方法存在一定的局限性，如靈敏度和特異性不夠、無(wú)法得到融合斷點(diǎn)及伴伴侶基因和只能檢測(cè)已知融合形式等。隨著NGS技術(shù)的發(fā)展，基于DNA-NGS或RNA-NGS的融合檢測(cè)逐漸應(yīng)用于臨床，成為最優(yōu)的融合檢測(cè)方法。

圖2.ROS1融合基因結(jié)構(gòu)及細(xì)胞定位

三ROS1靶向治療

目前ROS1融合基因陽(yáng)性的NSCLC患者，一線治療NMPA和FDA批準(zhǔn)了克唑替尼，同時(shí)FDA也批準(zhǔn)了恩曲替尼，NCCN推薦色瑞替尼；在二線治療中，NCCN推薦勞拉替尼2。已開(kāi)展多種ROS1-TKI藥物臨床試驗(yàn)，克唑替尼治療NSCLC的ORR比較高達(dá)72%，中位PFS比較高達(dá)22.8個(gè)月，顱內(nèi)ORR達(dá)33%；恩曲替尼ORR、中位PFS和顱內(nèi)ORR分別為77%、19.0個(gè)月和55%，恩曲替尼的顱內(nèi)療效優(yōu)于克唑替尼。新型ROS1抑止劑勞拉替尼和Repotrectinib的ORR和顱內(nèi)ORR數(shù)據(jù)表現(xiàn)很優(yōu)秀，ORR分別為62%和91%，顱內(nèi)ORR分別為64%和100%。

ROS1-TKI在其他腫瘤中的應(yīng)用也有病例報(bào)告，如報(bào)道過(guò)克唑替尼治療非典型腦膜瘤和肺母細(xì)胞瘤，色瑞替尼治療乳腺癌和炎性肌纖維母細(xì)胞瘤的研究。此外有回顧性研究顯示，克唑替尼治療非CD74-ROS1的PFS長(zhǎng)于CD74-ROS1，NSCLC腦轉(zhuǎn)移患者的CD74-ROS1陽(yáng)性率高于非CD74-ROS1，暗示融合基因的亞型可能影響腫瘤的顱內(nèi)轉(zhuǎn)移。

表1.ROS1-TKI在NSClC患者中的臨床研究匯總

圖3.ROS1-TKI在NSClC患者中的臨床研究

四ROS1-TKI耐藥機(jī)制

如果是ROS1融合基因陽(yáng)性的NSCLC，可以使用靶向藥物如克唑替尼進(jìn)行相應(yīng)的治療。但往往治療一段時(shí)間后，腫瘤會(huì)演變出新的耐藥機(jī)制，耐藥機(jī)制包括ROS1激酶區(qū)的突變和旁路激活。

• ROS1激酶區(qū)的突變

如圖4所示，在臨床研究隊(duì)列A和B中，耐藥突變?yōu)?％和53%，而臨床前研究的耐藥突變比例遠(yuǎn)高于臨床研究的，這些突變?cè)诰w研究中也觀察到?？诉蛱婺岢Ｒ?jiàn)耐藥突變?yōu)镋1935G、L1947R、L1951R、G1971E、、L1982F、S1986F/Y、L2026M、G2032R、D2033N、C2060G、V2098I和L2155S；色瑞替尼耐藥突變?yōu)镋1990G和F1994L；恩曲替尼耐藥突變?yōu)镕2004C/I和G2032R。

• 旁路激活

旁路激活主要為RTK或MAPK信號(hào)通路基因突變或拷貝數(shù)增加，相關(guān)的基因有KRAS、NRAS、EGFR、HER2、MET、KIT、BRAF和MEK等。在臨床治療中克唑替尼耐藥出現(xiàn)KRASG12D和BRAFV600E突變，恩曲替尼出現(xiàn)NRASQ61K突變，另外ROS1-TKI治療后還會(huì)出現(xiàn)CTNNB1S45F和PIK3CA熱點(diǎn)突變。

目前對(duì)于腫瘤內(nèi)和腫瘤間的ROS1-TKI耐藥模式研究尚不充分，有研究報(bào)道一個(gè)病例，在cfDNA中檢測(cè)到ROS1G2032R，而肺部腫瘤組織未檢測(cè)到，用克唑替尼聯(lián)合化療治療有效，但最終還是疾病進(jìn)展，進(jìn)展后在胸腔積液中也檢測(cè)到ROS1G2032R。

圖4.ROS1-TKI耐藥機(jī)制

五小結(jié)

目前在ROS1融合基因陽(yáng)性NSCLC治療上，克唑替尼和恩曲替尼獲得上市批準(zhǔn)，色瑞替尼和勞拉替尼獲得NCCN指南推薦，新型ROS1-TKI正在開(kāi)發(fā)中，將進(jìn)一步提供更多臨床切實(shí)有效的藥物選擇，今后對(duì)于臨床ROS1融合基因陽(yáng)性患者，也將有更多臨床治療選擇。

參考文獻(xiàn)

1、AlexanderDrilon,ChelseaJenkins,SudarshanIyer,etal.ROS1-dependentcancers-biology,diagnosticsandtherapeutics.NatureReviewsClinicalOncology(2020).

2、NCCNGuidelinesVersion2.2020Non-SmallCellLungCancer.