(一) 縫隙連接與細胞接觸：Bi等［5］認為前藥的毒性代謝產(chǎn)物或自殺基因表達的酶通過細胞間縫隙連接傳入鄰近細胞，引起細胞毒作用。他們將tk-和tk+的HT1080細胞混合培養(yǎng)，并加3H標記的GCV，結(jié)果發(fā)現(xiàn)除了tk+的細胞可摻入3H標記的GCV外，與其相接觸的tk-細胞也可摻入3H標記的GCV，而未接觸的tk-細胞內(nèi)則沒有。Yang-L等［6］用大腸癌細胞體外進行實驗，發(fā)現(xiàn)連接蛋白-43與連接蛋白-26在BE中起重要的作用。對于CD基因引起的BE，則不需細胞接觸而發(fā)揮作用［4］，5-FU可不通過細胞接觸而發(fā)揮細胞毒作用［7］。可以設(shè)想，自殺基因表達的產(chǎn)物通過縫隙連接或易化擴散傳遞到周圍細胞后，降低了轉(zhuǎn)基因細胞內(nèi)基因表達的產(chǎn)物濃度，在應(yīng)用藥物前體后，對轉(zhuǎn)基因細胞殺傷作用減弱，從而延長了其成活時間，也可延長其向外傳遞基因產(chǎn)物的時間，可進一步增強BE的作用。

　　(二) 免疫反應(yīng)：Caruso等［8］報道在逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染的結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移動物模型中，經(jīng)GCV處理后發(fā)現(xiàn)腫瘤床有局部的免疫反應(yīng)，主要是CD4+和CD8+ T細胞，推測免疫反應(yīng)在自殺基因治療中起一定的作用。Freeman［9］通過PTPCR技術(shù)和免疫組 化技術(shù)發(fā)現(xiàn)，在具有BE的腫瘤細胞內(nèi)IL-1，IL-6的mRNA表達產(chǎn)物持續(xù)增多，使腫瘤細胞內(nèi)發(fā)生強烈的免疫反應(yīng)。Gagandeep-s等［10］在動物實驗中用表達HSV-tk逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞和結(jié)腸癌細胞接種M26小鼠，并且用GCV腹腔注射，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有免疫力的小鼠的腫瘤明顯消退，而在免疫抑制的無胸腺小鼠中卻未發(fā)現(xiàn)BE，更證實了免疫反應(yīng)在抗腫瘤中的作用。

　　三、 聯(lián)合治療

　　自殺基因療法有很多優(yōu)點，由于應(yīng)用先轉(zhuǎn)導(dǎo)后治療的途徑，使整個基因治療變得相對容易控制。它還可以直接殺傷腫瘤細胞，具有可誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，可靶向作用等特點。但是，它也存在不足之處，如：自殺基因誘導(dǎo)機體的免疫反應(yīng)不夠強大，體內(nèi)應(yīng)用對腫瘤細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率比較低等。這些均制約著自殺基因的應(yīng)用，于是，有的學者把目光投向了自殺基因的聯(lián)合治療。

　　(一) 自殺基因與細胞因子基因的聯(lián)合應(yīng)用：細胞因子是一類由免疫細胞和相關(guān)細胞產(chǎn)生的調(diào)節(jié)細胞功能的高活性多功能的蛋白質(zhì)分子，將細胞因子基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入腫瘤細胞內(nèi)，可以大大增強腫瘤細胞的免疫原性，有效誘導(dǎo)腫瘤細胞特異性抗腫瘤免疫功能。將自殺基因和細胞因子基因聯(lián)合應(yīng)用，可以取長補短，提高治療效果。一方面，自殺基因的表達可以直接殺傷一部分腫瘤細胞，消除腫瘤負荷。另一方面，細胞因子基因的表達可以激發(fā)機體的抗腫瘤免疫功能，這種聯(lián)合治療也已經(jīng)在大腸癌治療方面進行了實驗研究。

　　Chen等［11］對小鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的動物模型通過重組腺病毒載體分別轉(zhuǎn)導(dǎo)ADV/RSV-MIL-2基因和ADV/RSV-tk基因，然后給予GCV治療。實驗表明分別用IL-2基因，tk基因和兩者聯(lián)合治療的腫瘤面積分別為120mm2，25mm2和5mm2，并發(fā)現(xiàn)抗腫瘤效果的提高與IL-2介導(dǎo)的T細胞免疫增強有關(guān)。