文章轉(zhuǎn)載自“安捷倫診斷與基因組學”公眾號

Ki-67 是一種定位于細胞核的蛋白, 與核糖體 RNA 轉(zhuǎn)錄有關(guān), 可以作為一個細胞增殖的標記物。Ki-67 在細胞增殖的各期(g1,s,g2 和 m)中均有表達,但在細胞靜止期 g0 期不表達。Ki-67 是病理科最常開展的免疫組化檢測項目，每一種腫瘤均需檢測。通過 Ki-67 指數(shù)高低，判斷腫瘤分化程度、浸潤、轉(zhuǎn)移及預后[1]。

在免疫組化檢測過程中，通常使用扁桃體作為對照。在扁桃體里面，Ki-67 呈現(xiàn)出在扁桃體生發(fā)中心暗區(qū)的 B 細胞中等強度至強陽細胞核染色、基底和副基底鱗狀上皮細胞弱至中等強度細胞核的染色狀態(tài)[2]（圖 1）。

Ki-67 的克隆號有 MIB-1,SP6,K2,30.9,MX006 等。

圖 1. Ki-67 抗原 MIB-1 在扁桃體上染色 （安捷倫 FLEX 即用型一抗免疫組化，染色對照圖譜第一版[2]）

在甲狀腺變透明小梁腫瘤（hyalinizing trabecular tumor, HTT）中，出現(xiàn) Ki-67 抗體細胞膜陽性是不是正確的表達呢？

Hirokawa 等[3]研究發(fā)現(xiàn)，使用 MIB-1 克隆號抗體在 13 例甲狀腺變透明小梁腫瘤中，90%或以上的腫瘤細胞中表現(xiàn)出細胞膜和細胞質(zhì)強陽性（圖 2）。10 例狀癌均未見細胞膜或細胞質(zhì)陽性，正常定位于細胞核。所以，在 MIB-1 克隆號表達細胞膜和細胞質(zhì)陽性是甲狀腺透明小梁腫瘤的特征。MIB-1 染色有助于鑒別透明化小梁腫瘤與狀癌，后者與透明化小梁腫瘤有許多相同的細胞學和組織學表現(xiàn)。

圖 2. Ki-67 抗原 MIB-1 在甲狀腺變透明小梁腺癌上染色，使用 Dako MIB-1 克隆號。

該現(xiàn)象在其他部分腫瘤中也有發(fā)現(xiàn)，例如部分浸潤性乳腺癌 (圖 3) [1]、間皮瘤以及腎嗜酸細胞瘤[5]。在浸潤性乳腺癌里細胞膜/細胞質(zhì) Ki67 表達與高級別、HER2 擴增和 ER 的腫瘤顯著相關(guān)[1]。

圖 3.浸潤性乳腺癌 Ki67 細胞質(zhì)細胞膜陽性的兩種不同模式[1]。左:浸潤性導管癌伴管腔形成的極性表達。右圖: 胞膜的聚集性表達。使用 Dako MIB-1 克隆號，1:50 稀釋度；

Leonardo 等[4]使用了不同克隆號（MIB-1, 7B11, KIS5, KI88, SP6）的 Ki-67 抗體進行對比檢測。在手工以及自動化儀器之間，使用多種條件的染色流程，發(fā)現(xiàn)只有 MIB-1 克隆號的抗體在室溫會呈現(xiàn)甲狀腺透明小梁腫瘤細胞膜染色的特點。而與抗原修復方式、抗體孵育條件以及生物素或非生物素標記的顯色系統(tǒng)之間均無關(guān)（圖 4）。

圖 4[4]，在室溫下，使用 MIB-1 和過氧化物酶、無生物素檢測系統(tǒng)檢測，出現(xiàn)膜陽性。

A

甲狀腺透明小梁腫瘤 (250X)，

B

浸潤性乳腺癌 (250X)，

C

腎嗜酸細胞瘤(400X)。

同樣的病例，沒有膜陽性表達。

D

在 37 度使用 MIB-1 染色甲狀腺

透明小梁腫瘤 (400X)，同圖 A 標本。

E

使用 SP6 克隆號，在浸潤性

乳腺癌中(250X)，同圖 B 標本。

F

7B11 克隆號在腎嗜酸細胞瘤 

(400X)，同圖 C 標本。

正常細胞中 Ki-67 存在兩個含 3256 及 2896 氨基酸的亞型，兩者之間的差異是長片段亞型多出一個 360 個氨基酸的肽段。造成該細胞膜染色現(xiàn)象的確切機制尚不清楚，推斷可能的原因是，在某一細胞膜組分的幫助下，Ki-67 與 MIB-1 抗體的 Fab 段結(jié)合，存在交叉反應。

雖然確切機制未明，但在甲狀腺透明小梁腫瘤中，MIB-1 克隆號的膜染色是特征性現(xiàn)象，使用該克隆號出現(xiàn) Ki-67 膜染色，即可診斷為 HTT。

以上內(nèi)容僅限研究使用。不可用于診斷目的。